Aplicação de métodos de deteção de fatores de patogenicidade de Escherichia coli, e a sua importância num contexto de Saúde Pública

OBJETIVOS

• Compreender a diversidade de E. coli, bem como os diferentes patótipos e a sua relevância clínica;
• Compreender a problemática da colonização de ETEC;
• Desenvolver competências na área da biologia molecular, através da introdução aos métodos de identificação molecular, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), PCR em tempo real (qPCR), eletroforese em gel;
• Desenvolver competências na área da microbiologia, através de técnicas decultivo e isolamento seletivo de ETEC de amostras de fezes.

METODOLOGIA

Parte teórica:

• Introdução à formação;
• A diversidade da espécie E. coli;
• Patótipos de E. coli e os seus fatores de virulência;
• Patótipos de E. coli causadores de diarreia: diversidade e distribuição;
• Epidemiologia e o impacto das ETEC num contexto de Saúde Pública;
• Métodos de deteção para identificação de ETEC;
• Aplicações Práticas.

Parte Prática: Deteção de ETEC

• Exemplificação da manipulação de uma amostra clínica de fezes (enriquecimento em meio de cultura específico);
• Exemplificação prática de um método molecular, baseada na reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR), para detetar com precisão os determinantes genéticos dos principais fatores de virulência, ST/LT/Stx2, expressas por ETEC;
• Exemplificação do isolamento de ETEC com recurso a meios de cultura;
• Caracterização das estirpes de ETEC isoladas (fimbrias e toxinas) por PCR multiplex;
• Análise dos resultados